elisa法检测试剂盒

发布时间:2023年5月1日 10:35

Elisa法(ELISA,enzyme-linked immunosorbent assay)是一种基于特异性抗原与抗体反应的分析技术,广泛应用于医学、生物学、化学等领域。其检测原理是利用固相化学技术,在微孔板表面上固定抗原或抗体,然后将待检生物样品加入,使其与微孔板表面的固定物发生特异性反应,接着加入酶标记的第二抗体或底物,利用酶的催化作用,形成明显的颜色反应信号,从而定量分析待检物质的含量。因此,Elisa法检测试剂盒是一种基于这种技术原理所制备的检测产品。

Elisa法检测试剂盒具有高灵敏度、高特异性、操作简单、重现性好等特点,且能够同时检测多种生物标志物,被广泛应用于临床医学、生物学研究、食品检测等领域。主要包括两类:直接Elisa和间接Elisa。

直接Elisa法检测试剂盒

直接Elisa法检测试剂盒是指待检样品直接与已成功固定于微孔板上的抗原结合,使用可以检测该抗原的一抗标签标记的检测试剂盒。其检测过程简单、操作快捷、灵敏度高,能够直接检测到样品中的目标物,常用于血清学、免疫学、微生物学、生物技术等领域。

直接Elisa法检测试剂盒操作步骤:

1. 使用已经预包装且预处理好的微孔板,将待检样品加入。

2. 洗涤吸光度板,然后加入一抗标准品,将其与待检样品中的特定分子结合。

3. 再次洗涤吸光度板,将标记有染料的二抗加入,其能够结合到一抗标签中,形成大量染色复合物。

4. 再次洗涤吸光度板,加入底物,并反应。该底物会被染色复合物催化分解,生成某种信号指示物质。

5. 在反应结束后,加入停止反应剂,使反应停止。

6. 测量样品的吸光度值,并根据标准曲线计算样品中目标物质的含量。

间接Elisa法检测试剂盒

间接Elisa法检测试剂盒是指先将待检样品加入微孔板中,与固定于微孔板中的抗原特异性结合,接着加入第一抗体、第二抗体等多种试剂,其中第二抗体被加入时已与酶或荧光素标记上。该标记抗体可以形成酶标记物或荧光素标记物,进而产生可见光或荧光等信号。其比直接Elisa法检测试剂盒检测信号更加灵敏、精确,因此常用于生物分子分析、免疫学等领域。

间接Elisa法检测试剂盒操作步骤:

1. 使用已经预包装且预处理好的微孔板,将待检样品加入。

2. 盖紧吸光度板,让其充分与待检物结合。

3. 洗涤吸光度板,并加入第一抗体,该抗体会锁定样品中特定的免疫物质。

4. 再次洗涤吸光度板,加入标记有荧光素或酶的二抗,该抗体能够识别第一抗体,并在其上标记荧光素或酶。

5. 再次洗涤吸光度板,加入底物。经过若干周期的催化后,底物会生成染色标志物。

6. 在过程的最后加入停止反应剂,使反应中断。

7. 测量样品的吸光度值,并根据标准曲线计算出样品中目标物质的含量。

综上所述,elisa法检测试剂盒是一种基于固相化学技术和特异性抗原与抗体反应的分析技术,具有高度的特异性、重现性和简单易行的优点,在多种领域都有广泛应用。