乳酸菌(lactic acid bacteria)是一类重要的微生物,广泛存在于自然界中的土壤、水体、动物肠道和食品等多种环境中。乳酸菌具有发酵作用,可以将多种物质转化为乳酸等有机酸,从而使食品保持新鲜、延长货架期限等。因此,乳酸菌在食品加工业中得到了广泛应用。检测乳酸菌的数量和种类对于食品加工业具有重要意义。
一、乳酸菌的检测方法
1、传统方法
传统的乳酸菌检测方法包括接种法、显微观察法、生理生化特性检测法等。这些方法的检测结果通常需要较长的时间,且操作难度较大。
2、分子生物学方法
分子生物学方法包括PCR、实时荧光PCR、基因芯片、测序等。这些方法具有高灵敏度、高准确性、快速、简便等优点,但需要一定的技术支持和设备投入。
二、乳酸菌的检测技术
1、PCR技术
PCR技术是在体外进行DNA复制的一种快速有效的检测方法。将样品中的DNA放在特定的反应环境中,之后通过PCR扩增得到目标DNA。PCR技术具有灵敏度高、特异性强、操作简便、快速等优点。目前,PCR技术已成功用于乳酸菌检测。
2、实时荧光PCR技术
实时荧光PCR技术是一种新型的PCR技术。该方法利用荧光染料和一些特殊的PCR反应系统,可以在PCR过程中实时检测PCR产物的数量,从而可以在反应过程中精确测量目标DNA的含量。实时荧光PCR技术具有灵敏度高、特异性强、操作简便、快速等优点,可以快速检测出乳酸菌。
3、基因芯片技术
基因芯片技术是一种利用固相化学合成技术或喷墨技术将许多不同的DNA分子印在玻璃、硅片或其他材料上的技术。在分子筛选过程中,玻璃芯片上的DNA分子与目标DNA的互补配对,形成DNA-DNA杂交芯片。随后利用成像检测芯片上的荧光信号,并计算每个DNA分子的信号值。基因芯片技术具有高通量、快速、高准确度、灵敏度高等优点。
三、乳酸菌的检测标准
国际标准(ISO)和中国标准(GB)对乳酸菌的检测均有规定。GB 4789.35-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验》规定了食品中乳酸菌的检测方法和标准。
四、结论
乳酸菌是为食品工业提供益生菌的一类细菌。为了保证食品安全,乳酸菌的检测必须得到足够的重视。目前,PCR技术、实时荧光PCR技术和基因芯片技术等新型检测技术已经得到广泛应用,并且在乳酸菌检测中具有重要的应用前景。