蛋白质是构成生命体的重要组成部分,也是人体必需的营养成分之一。因此,对于食品中蛋白质的测定十分重要。下面将介绍四种蛋白质测定方法。
一. 比色法
最早被应用于蛋白质定量的方法便是比色法。这种方法的基本原理是利用试剂与蛋白质发生化学反应,产生显色的产物,从而通过比色法进行测定。不同试剂适用于不同蛋白质,如用菲尼苯试剂比色法适用于动物性蛋白质的测定。由于比色法分析简单,快速、灵敏度高等优点,所以至今仍被广泛地应用。
但是,这种方法容易受到物质的干扰,误差较大。并且,由于它是经过化学反应产生色素以后的比色,故容易受到色素稳定性的干扰,从而降低其精度。
二. 低毒性硫酸钠比色法
低毒性硫酸钠比色法主要用于测定蛋白质含量低的样品,如婴儿食品或某些营养餐品。该方法使用低毒性的硫酸钠替代菲尼苯试剂,从而减少对人体的危害。并且,该方法比色灵敏度高,能够满足较高精度的需求。
三. 完全水解法
该方法将蛋白质水解成氨基酸,通过检测氨基酸的数量来确定蛋白质含量。完全水解能够保证测定的准确性,但是该方法操作复杂,需要时间长,同时也可能造成氨基酸的损失。
四. 氮元素分析法
氮元素分析法通常采用库氏试验,其原理是通过将样品中的氮原子与含有化学吸收原子的化合物反应,从而测定样品中的氮含量,进而得到蛋白质含量。
以上四种方法各有优劣,具体选择哪种方法应根据样品状况和实验目的来定。同时,在蛋白质测定中,标准物质和标准曲线的准确性十分重要,需要严格把控。