一、引言
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,简称SA)是一种常见的病原微生物,能引起各种感染性疾病,如皮肤疾病、淋巴结炎、败血症、心内膜炎等。为了保证食品安全和公共卫生,对SA的检测至关重要,下文将详细介绍SA检测执行标准、检测项目以及注意事项。
二、检测执行标准
(一)国际标准
ISO 6888-1:1999 食品和饲料中的水平膜过滤法和平板计数法检测葡萄球菌。
(二)国内标准
GB 4789.10-2016 食品微生物学检验方法 葡萄球菌菌落计数法和竹芋培养基平板检测法;
GB/T 23769-2009 食品微生物学检验方法 巴氏杀菌奶、长效杀菌奶和乳清中金黄色葡萄球菌检验方法。
三、检测项目
(一)采样
采样应按照食品安全国家标准的要求,在生产过程中、产品上市前、经销过程中及其它风险点,选择代表性样品进行检测。
(二)压菜法
在营养琼脂或其他平板上点草莓状或条状菌液,无规则,以避免相互干扰,接上营养琼脂,温度37℃,孵育24-48小时,按菌落数计算。
(三)PCR法
SA通过PCR技术检测,从参检食品检体中提取DNA,PCR扩增目标DNA段,进行凝胶电泳,分析结果。
(四)ELISA法
沿用传统的ELISA方法,在适当的条件下,将SA特异血清与需要检测的食品样品共同结合,凝聚反应物,定量分析。
四、检测注意事项
(一)引物的设计必须特异性。
(二)PCR扩增反应体系的设计必须合理、选择合适的样本。
(三)PCR扩增温度梯度法应用在模拟操作。
(四)需要使用适量的DNA模板,避免过多或过少。
(五)快速细胞计数应使用与半自动和全自动计数相比较的测试参考数据。
(六)进行细菌物种鉴定时,应注意同时检测或排除其他可能的细菌污染。
总之,金黄色葡萄球菌是一种常见的食品及环境污染菌,具有很强的耐热性和耐盐性,在食品加工过程中易受污染。开展SA的检测标准和注意事项,对于公共卫生和食品安全至关重要,相关部门需要认真研究,提高对检测的重视程度。