蛋白质是生命体系中非常重要的一类有机小分子，其广泛参与到许多生理过程中。蛋白质的浓度是研究其在生命体系中作用的一个重要指标。目前常用的蛋白质测定方法主要包括生化分析、免疫分析、色谱分析等方法。下面将详细介绍这些方法的原理及优缺点。
1. 生化分析
生化分析是一种基于蛋白质的生物化学性质进行分析的方法。常用的生化分析方法有低丙酮酸脱氢酶（LDH）法、布拉德福德法等。其中，布拉德福德法被广泛应用于蛋白质测定中。其基本原理是：在酸性条件下，蛋白质中的二十种氨基酸中，苯丙氨酸和色氨酸与非离子性染料结合，形成分子复合物，由此可以通过分光光度计来确定蛋白质的浓度。布拉德福德法具有操作简便、检测灵敏度高的特点，同时有一定的特异性，但测定范围有限，不适用于表达量较低的蛋白质。
2. 免疫分析
免疫分析是利用特异性抗体与蛋白质产生特异性反应进行蛋白质测定的方法。常用的免疫分析方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫印迹法（Western blot）。其中，ELISA是利用酶标记抗体与待测蛋白质特异性结合，在酶作用下产生发色反应，测定蛋白质浓度的方法。而Western blot则是利用蛋白质电泳分离技术，再利用免疫检测方法检测待测蛋白质，具有确诊作用。免疫分析具有非常高的指示性，但需要特异的抗体，且需要免疫操作，因此对样品数量、质量要求较高。
3. 色谱分析
色谱分析方法是利用不同的分离原理，将混合物中各组分分离出来，进而进行定量分析的方法。常用的色谱分析方法主要有气相色谱（GC）、液相色谱（HPLC）等。其中，HPLC是目前蛋白质测定中最常用的方法之一。HPLC测定蛋白质浓度的原理是将样品经过特定的处理后，以多肽组成为基础，通过高效液相色谱分离，最终通过检测蛋白质与色谱柱中固定相的相互作用，来测定蛋白质的含量。HPLC测定蛋白质具有分离准确、灵敏度高的优点，但需要专业的分析仪器支持，操作较为复杂。
总之，不同的蛋白质测定方法各有优缺点，具体选择取决于具体情况。目前，综合以上三种测定方法在实际应用中被广泛使用。