BCA法（Bicinchoninic Acid，双香豆酸）是一种测定蛋白质浓度的方法，也是常用的比色法之一。BCA法具有灵敏度高、稳定性好等优点，在蛋白质定量中得到了广泛应用。以下是BCA法测定蛋白浓度的详细描述。
1. 方法原理
BCA法是利用双香豆酸钠（BCA）与蛋白质中的还原型 Cu2+ 进行络合反应，生成紫色化合物 [Cu(I)-BCA]，并产生吸收峰，光密度与蛋白质浓度成正比。这种反应比较灵敏，系统误差较小，且与蛋白质种类无关。
2. 实验步骤
（1）制备标准曲线：准备一组不同浓度的蛋白质标准品，通常是0、2.5、5、10、20、40μg/ml等，加上BCA试剂，孵育30min，然后测量吸光度，得到吸光度与蛋白质浓度成正比的标准曲线。
（2）测量样品光密度：取待测样品，加上BCA试剂，孵育30min，然后通过光谱法测定光密度。
（3）计算样品中蛋白质含量：将测得的样品光密度值代入标准曲线中，根据光密度与蛋白质浓度的比例关系，计算出样品中的蛋白质含量。
3. 实验优点
BCA法测定蛋白质浓度具有以下特点：
（1）BCA试剂对蛋白质种类的适应性广；
（2）测定范围较宽，能够测定低至0.2μg/mL的样品；
（3）系统误差较小，重复性好；
（4）实验操作简便快捷，且样品储存期长。
4. 实验注意事项
BCA法测定蛋白质浓度需要注意以下事项：
（1）使用纯度较高的蛋白质标准品；
（2）样品应保持干燥，避免与酶等物质接触；
（3）BCA试剂应避免任何杂质的污染。
总之，BCA法是一种测定蛋白质浓度的可靠方法，其操作简便快捷，有效地减小了系统误差。在生物学研究中，BCA法广泛应用于蛋白质定量和研究中。