蛋白半衰期是指蛋白质在细胞内或体内中存在的时间长度。蛋白质的半衰期是决定细胞中蛋白质水平稳态的主要因素之一。在研究蛋白质的生物学功能、代谢通路及疾病发展等过程中，蛋白质半衰期的测定和分析是非常重要的。
蛋白质半衰期的测定方法主要有放射性和非放射性两种方法。
一、放射性标记法
放射性标记法是通过给蛋白质加上一个放射性同位素的标记来检测其半衰期的方法。常用的放射性同位素标记有氚、碳14和硫35等。其中，碳14的利用较多，因为它分布均匀，易于合成，并且放射性半衰期长（5700年），应用时也相对较安全。
在放射性标记法中，通常先将蛋白质加上放射性同位素标记，再将其加入到含有细胞的培养基中。在一定时间内，收集培养基中的样本，通过放射计数器测定标记物的放射性计数，然后计算蛋白质的含量和半衰期。该方法的优点是测量精度高，缺点是需要较专业的设备和技术，并且安全风险相对较高。
二、非放射性标记法
非放射性标记法是通过利用蛋白质的生物学性质或者化学特性来测定其半衰期的方法。例如，在质谱法中，可以通过蛋白质降解产物的质谱峰来计算半衰期，但该方法比较昂贵。另外还有利用抗体对特定蛋白质进行检测的方法，例如西方印迹法。此外，还可以利用荧光标记和生物素标记等技术对蛋白质进行标记，然后通过荧光染色和化学检测等方法来测定其半衰期。
除了以上两种方法，还有一些新型技术被开发出来。例如，可以利用蛋白质组学技术来测定蛋白质的半衰期，其中包括质谱组学、免疫印迹组学等。这些方法具有快速、高通量、灵敏度高、样品消耗小等特点，已经成为蛋白质半衰期测定的新兴技术。
总的来说，蛋白质半衰期测定是一个重要的技术，在细胞生物学、药理学等方面有广泛的应用。各种方法各有优劣，应根据实际需求选择适合的技术。