双缩脲法，也叫做Bradford法，是目前测定蛋白质含量最常用的方法之一。其基本原理是利用某些化学物质和蛋白质的作用，使蛋白质分子变成带正电荷的化合物，然后通过颜色的变化来测定样品中蛋白质的含量。
双缩脲法的主要原理是基于布拉德福德蛋白质染色试剂的吸收光谱特性。在这种试剂的存在下，蛋白质的分子会发生一系列的复杂反应，导致吸收光谱出现明显的变化。在试剂的存在下，蛋白质的分子与染色试剂发生非共价结合作用，形成一种蓝色的化合物。这种化合物的含量与蛋白质的浓度呈线性关系，因此可以利用光谱分析来测定样品中蛋白质的含量。
双缩脲法的操作步骤及注意事项如下：
1.制备试剂：将染色试剂与某些化学试剂（如甲醛、NaCl等）混合制成工作液。
2.制备标准曲线：制备一系列不同浓度的蛋白质标准溶液，分别与试剂反应，并通过光谱分析仪测定不同浓度下的吸收值，从而得到标准曲线。
3.测定样品：将待测蛋白质溶液与试剂反应，完全混合后，在特定波长处读取吸收曲线。根据标准曲线，可以计算出样品中蛋白质的含量。
双缩脲法的优点是使用方便、快速、敏感度高、重复性好，因此广泛应用于生物化学、分子生物学等领域中对蛋白质含量的测定。但是该法也有其局限性，如对一些特殊的蛋白质如胆固醇、抗体等可能会产生干扰，需要注意防止误差的产生。
总之，双缩脲法是一种简单、准确、重复性好的测定蛋白质含量的方法，尤其适合于大批量样品的快速测定。