宿主蛋白残留检测方法

发布时间:2023年10月18日 12:35
标签: 宿主| 蛋白| 检测

宿主蛋白残留是指在制药过程中,悬浮液、培养基、生产设备等可能存在的宿主细胞蛋白在制剂中的残留。宿主蛋白残留会对制剂的稳定性、质量和有效性等产生不良影响,因此建立有效的宿主蛋白残留检测方法是制药企业必不可少的工作。

一般来说,宿主蛋白残留检测的方法主要分为两大类:荧光检测和生物学检测。

1、荧光检测:

荧光检测是一种快速、灵敏、简单的定量检测方法,常见的方法有ELISA(酶联免疫吸附法)和Western Blotting(蛋白印迹法)。

ELISA法通过特异抗体的配对结合制定一个双抗体夹心试验系统,利用与标准宿主蛋白浓度相同的宿主蛋白样品进行检测,通过荧光染料检测来判断样品中宿主蛋白残留量。

Western Blotting法基于蛋白质分子量差异、电泳分离和传递的原理,可快速鉴别蛋白质分子种类和含量。

这两种方法具有灵敏度高、稳定性好、重复性强等特点,是普遍应用和推荐的方法。

2、生物学检测:

生物学检测法包括细胞增殖、生物活性实验等方法。

常用的细胞增殖法包括MTT法、Sulforhodamine B法等。这些方法可以通过测定宿主蛋白残留的对细胞的生长影响,来鉴定样品中宿主蛋白残留量的多少。生物活性实验可检测样品中的催化活性,以此来确定宿主蛋白残留量的多少。

总的来说,在宿主蛋白残留检测方法的选择时,需要考虑检测方法的敏感性、准确性、可重复性、操作简便性等因素,结合样品特点和目的,综合选择合适的方法,确保制剂中宿主蛋白残留量符合规定的标准和要求。