lowry法测蛋白质含量原理

发布时间:2023年10月21日 15:27

Lowry法测量蛋白质含量是一种光谱分析方法。光谱分析方法是一种化学分析技术,可以通过测量分子吸收或发射光信号的强度来分析分子结构和含量。Lowry法是一种较为常用的测量蛋白质含量的光谱分析方法。

Lowry法的原理是利用蛋白质中的丝氨酸、脯氨酸等表面暴露的含有羟基的氨基酸与碘离子反应,生成紫色色素,测定紫色色素的吸光度,从而确定蛋白质的浓度。此外,还有三价铜离子与含有酪氨酸和色氨酸的蛋白质反应可以产生相同的紫色色素。

整个实验分为两个步骤,第一步是将蛋白质样品加入试管中,与一种叫做甲醛的试剂混合后,在酸性条件下99℃水浴加热20分钟,使蛋白质完全水解为氨基酸。第二步是将试管中反应液冷却后,加入测定紫色色素的试剂,如苯乙酰丙酮、碱液等等,测定吸光度。然后将得到的吸光度值与标准曲线进行比对,确定蛋白质的浓度。

Lowry法的优点在于测定范围广,可以测定低至0.1ug/mL的蛋白质浓度,并且可以使用小样品量,灵敏度高。另外,这种方法也被广泛应用于其他生物分子的测定中,例如多酚、DNA、RNA等的浓度测定。

总之,Lowry法是一种较为简单、精确的测定蛋白质含量的方法,利用化学反应生成紫色化合物的原理进行测定,非常适用于常规的实验室测量。