Western blot检测蛋白是一种广泛应用的实验技术，用于检测蛋白质的存在和特定性。Western blot技术基于电泳分离样品中的蛋白，用特定抗体对其进行识别和检测。Western blot技术在许多实验室和研究领域广泛使用，包括生物医学，生物学和生物化学。
Western blot技术主要由以下几个步骤组成：
1. 电泳分离：将样本蛋白通过凝胶电泳分离，以获得目标蛋白。
2. 转移：将分离的蛋白从凝胶中转移到含有亚硝酸盐的膜中，通常为聚丙烯腈或硝酸纤维素膜。这将允许蛋白结合转移膜，并用于后续免疫印迹的步骤。
3. 阻断非特异性结合：这一步是为了防止非特异性抗体粘附到转移膜上，从而降低后续抗体的特异性结合。在该步骤中，使用洗涤剂和非蛋白质绑定的物质，例如牛血清白蛋白或鱼肝油等。
4. 第一次抗体混合：这一步骤使用特定的一抗来结合转移膜上的蛋白。抗体的选择与蛋白质的结构和功能有关。该抗体与已知蛋白标记的抗体特异性不同，在转移膜上识别蛋白质。
5. 第二抗体结合：一旦第一次抗体识别了转移膜上的蛋白，第二次抗体就被添加到体系中。这个抗体与第一次抗体结合，通常是在碱性磷酸酶或过氧化物酶的存在下。这将使标记的蛋白产生化学发光或颜色反应。
6. 显示或检测：检测可以通过放射性，化学发光或特定颜色反应完成。使用荧光，应用特定的相机或成像装置可以捕捉特定的发射信号或扫描现场。将荧光或化学发光测量数据与已知的标准进行对比，以确定样品中的蛋白质种类和水平。
Western blot检测具有以下优势：
1. 得到单独蛋白分离后的可靠性高， 仅仅通过手工制备较为稠密膜作为载体，就可以对非常少量的蛋白进行检测，不需要对全部的蛋白进行分离，并且通过调配特定的抗体，高效率的分离蛋白。
2. 使用出结果较快且便于操作。 Western blot技术可以快速分析和检测复杂的样品，如生物液体，新发现的蛋白质或变异的蛋白质。整个实验时间在1－2天之内就可以完成。
3. 特异性强。 Western blot技术具有高度的特异性。通过专业定制的抗体，可以使检测到的蛋白质水平精确到非常低的数量级。
总之，Western blot技术是一种广泛用于检测蛋白质存在和特定性的技术。这种技术具有操作容易，结果快速，特异性强等优点，因此得到了生物医学，生物学和生物化学等领域的广泛应用。