不属于测定蛋白质分子质量的方法

发布时间:2023年5月4日 03:32

测定蛋白质分子质量的方法包括低速离心、SDS-PAGE电泳、Western Blot和质谱等。其中,Western Blot和质谱是比较常见的方法,能够精确地测定蛋白质的分子质量。而低速离心和SDS-PAGE电泳虽然也能够大致测定蛋白质的分子质量,但精确度不如Western Blot和质谱。

然而,本文要阐述的是不属于测定蛋白质分子质量的方法,因此我们需要先回顾一下,测定蛋白质分子质量的方法的基本原理。

低速离心是一种分离悬浮物中颗粒的简单方法,可用于分离大量的细胞、细胞器和聚集的蛋白质。它是利用离心力将悬浮液中的颗粒沉淀下来,分离出分子量较大的蛋白质分子。

SDS-PAGE电泳是一种常用的分离蛋白质的方法,利用电场将混合蛋白质分子分离开来。首先,通过加入十二烷基硫酸钠(SDS)使得蛋白质分子的分子量变得相对均匀;其次,电泳时,直接受电性质力作用迁移,可以通过相对迁移率的大小来粗略地估计蛋白质的分子量。

Western Blot是一种检测蛋白质的方法,基于SDS-PAGE电泳分离出的蛋白质分子进行的。Western Blot利用亲合试剂(如抗体),将需要检测的蛋白质分子与其他蛋白质分子分离开来,通过分子量和分子的表达量来确定某种蛋白质分子。在这里,Western Blot需要将分离出的蛋白质分子转移至膜上,再进行染色等操作才能进行检测。

质谱是一种精确测定蛋白质分子质量的方法,主要基于蛋白质在质谱中的质子化,质谱可以测得蛋白质的化学组成、序列、修饰以及互作等信息。 质谱主要有两种类型: 质量分析仪和质谱成像。在质量分析仪中,蛋白质分子被离子化,然后通过磁场进行分离,测定离子的电荷和质量,以此推算蛋白质的质量和其他化学信息;在质谱成像中,质谱仪配合光学显微镜将样品转换成位置信息、时间信息和质量信息三维图像。

因此,不属于测定蛋白质分子质量的方法,可以是: 酶联免疫法(ELISA)、核磁共振(NMR)以及生物传感器等。这些方法虽然也能够检测蛋白质分子,但不是直接测定蛋白质分子的分子量的技术。酶联免疫法(ELISA)是一种特定抗体与蛋白质结合之后,通过酶作用发出荧光信号,检测蛋白质的方法。核磁共振(NMR)则可以测量分子的结构和构象等信息,是一种测定蛋白质空间结构的方法。而生物传感器是一种利用生物分子特异性和灵敏性检测分析物的仪器,比如利用蛋白质结构对其他化合物的检测能力等,也不属于测定蛋白质分子质量的方法。

综上所述,测定蛋白质分子质量的方法有多种,包括低速离心、SDS-PAGE电泳、Western Blot和质谱等,其原理各异。而不属于测定蛋白质分子质量的方法,则可以是诸如酶联免疫法(ELISA)、核磁共振(NMR)以及生物传感器等技术。