液相色谱（Liquid Chromatography, LC）是一种分离化合物或混合物的技术，已成为生物分析化学的一项基本分析技术。液相色谱广泛应用于分离、提纯和分析生物大分子（如DNA、RNA、蛋白质等）及其衍生物。
蛋白质是生命体中的重要组成部分，其含量的测定对于有关生物学实验的定量和质量控制至关重要。常用方法包括光度法、分光光度法和比色法，但它们都存在一些缺点，如特异性低，灵敏度低，耗时长。
相比之下，利用液相色谱技术测定蛋白质含量更具有优势。液相色谱技术可以克服传统测定方法中的诸多困难，在速度、灵敏度、特异性等方面都有较大的优势。
根据不同的检测原理，液相色谱中用于蛋白质含量测定的方法也各不相同。下面对该主题进行探讨。
一、离子交换液相色谱（Ion Exchange Liquid Chromatography, IEX）
离子交换液相色谱利用树脂吸附蛋白质中带电荷基团的原理进行分离和检测。树脂中含有一些离子基团，如磺酸基、羧基和氨基等，这些基团与蛋白质中的离子基团相互作用，达到了分离其它物质，测定蛋白质含量的目的。
在离子交换液相色谱中，样品中的蛋白质样品通常可溶于磷酸缓冲液或甘胺酸缓冲液中。液相色谱柱中的离子交换层根据样品的 pH 值或缓冲液 pH 值的调节，从而改变树脂电荷，对带电荷的蛋白质进行吸附和分离。纯化的蛋白质可进行进一步的质量检测和鉴定。
二、尺寸排除液相色谱（Size Exclusion Liquid Chromatography, SEC）
尺寸排除液相色谱基于蛋白质的大小和形态差异进行分离。在液相色谱柱中，填充有大小隔离蛋白质的树脂，大分子蛋白质只能通过树脂孔径大的区域，并因受到分子间作用力而逗留在分离柱内，相反，小分子蛋白物质则选择地通过了较小孔径的树脂区域，从而实现分离和测定蛋白质含量。
尺寸排除液相色谱测定一般需要切断蛋白质聚集体，以便在分离前分解分子量递增的大分子蛋白质。如果使用过程中发现蛋白质在部分细胞区域聚集，建议使用离心机进行分离，以保证蛋白质被有效地分解。
三、反相液相色谱（Reversed-Phase Liquid Chromatography, RPLC）
反相液相色谱是将取样含蛋白质的溶液置于一个环氧反相柱中，然后通过控制不同极性的溶剂系统，稀释或梯度洗脱样品。根据脱落顺序来推定样品中蛋白质含量。
不同种类的样品，不同的溶剂肌性和pH值都需要不同的反相液相色谱柱。对于不同的蛋白质，需要充分探索和比较不同类型列的适用性，以获取满足要求的结果。
虽然液相色谱技术与传统方法相比仍有一定的局限性，但是应用得当的话，液相色谱仍然可以更加有效地进行蛋白质含量测定。液相色谱技术相对于其他方法具有出色的速度、检测下限低，分辨率高等特点，适用于大量蛋白质产品的分析鉴定。因此，我们有充分理由相信，液相色谱在蛋白质含量测定方面将发挥更加重要的作用。