双缩脲是一种有效的还原剂,可以还原人体内的蛋白质,使其在餐后能够被更好地吸收利用。因此,双缩脲测蛋白质含量是一种常用的蛋白质检测方法。本文将从以下几个方面介绍双缩脲测蛋白质含量的相关知识。
一、双缩脲的作用
双缩脲是一种氨基酸还原剂,能够还原蛋白质中的二硫键,使其分子结构松散,从而增加其可溶性和生物利用率。一些食品成分如肉类、蛋类等蛋白质含有大量的二硫键,因而难以被人体充分消化吸收。而双缩脲的添加可以有效降低蛋白质中的二硫键含量,使蛋白质更易于被利用,从而达到促进人体健康的作用。
二、双缩脲测蛋白质含量的原理
双缩脲测蛋白质含量的原理是利用双缩脲的还原作用将蛋白质还原成氨基酸,然后通过比色法测定氨基酸的含量来计算蛋白质含量。其具体操作流程如下:
1.定量称取待测溶液,经混合平衡后过滤掉悬浮物,得到一定体积的滤液。
2.将滤液分别加入加热蒸发器中,在60~70℃加热至干燥,得到蛋白质样品。
3.将干燥后的蛋白质样品加入碱液中,在100℃水浴中加热2小时,使蛋白质中的二硫键断裂。然后在常温下冷却。
4.加入双缩脲溶液,还原蛋白质成氨基酸。
5.再加入多糖试剂和氨基酸比色液,混合后在530nm处测定吸光度值。
6.根据比色板或标准曲线所得吸光度值计算蛋白质的含量。
三、双缩脲测蛋白质含量的优点
双缩脲测蛋白质含量的优点是操作简便,结果准确可靠,对多种样品适用。此外,在蛋白质含量低的样品中,双缩脲法的检测灵敏度较高,能够进行有效的检测。
四、双缩脲测蛋白质含量的注意事项
在进行双缩脲测蛋白质含量时,需要注意以下几点:
1.样品中有可能存在的干扰物質需要进行分离净化处理,以保证结果的准确性。
2.测定中应避免阳光直接照射,以免影响结果准确性。
3.在试剂和操作中必须严格遵循规定的操作步骤和时间,以免影响结果。
总之,双缩脲测蛋白质含量是一种有效的蛋白质检测方法,其原理简单,操作方便,结果准确可靠,具有广泛的应用前景。在实际应用中,需要根据具体情况选择不同的方法进行蛋白质含量的检测,以达到更好的效果。