糖化血糖蛋白怎么测

发布时间:2023年8月25日 18:47

糖化血糖蛋白(HbA1c)是测量血液中糖化血红蛋白的一种指标,可以用于检测血糖控制程度以及糖尿病的诊断和管理。糖化血红蛋白是红细胞内的一种蛋白质,在血液中的存在持续时间很长,它和糖分子结合,产生HbA1c。因此,HbA1c的水平可以反映出过去2-3个月内的平均血糖值,并且不受短期饮食和运动变化的影响,是评估糖尿病控制的可靠指标。

糖化血红蛋白的测量可以通过多种方法实现,其中最常用的是高效液相色谱法(HPLC)和离子交换色谱法(IEF)。下面我们将简单介绍这两种方法的测量原理以及操作流程。

HPLC方法

HPLC法是目前使用最广泛的测量HbA1c的方法。该方法基于色谱技术,通过洗脱荧光标记的HbA1c混合物,分离HbA1c和其他血红蛋白,并以探测器检测荧光信号进行定量分析。步骤如下:

1. 血样制备:在采血后,血液样本应立即送往检验实验室进行分离血红蛋白的准备。血红蛋白被提取后,通过脱氧步骤使其变成亚铁蛋白。

2. 样品的净化:净化步骤为去除脱氧步骤中添加的鱼精蛋白,同时还可以去除其他不需要的蛋白质。

3. 洗脱:将洗脱溶液加入样品,并将其添加到梯度溶液中,用在氟里昂或甲醇的典型溶剂中分离和分离HbA1c。

4. 分析:将前面洗脱的此类溶液取一个部分,并加入带有荧光基团的试剂。接下来,数据可以通过HPLC检测出HbA1c的浓度,也就是化验结果。

IEF法

IEF法是另一种常见的测量HbA1c的方法。该方法基于离子交换性质,将带有不同电荷、分子量不同的血红蛋白,依靠其异电定向杂交分离。步骤如下:

1. 血样制备:采血后,血液样本应立即送到实验室进行血红蛋白分离的准备。

2. 样品的净化:根据不同的方法和试剂,进行样品的净化和制备。

3. 离子交换:通过离子交换捕捉样品,并将其转移到离子交换膜上。

4. 定向杂交:样品上的凝胶电泳单元具有不同电荷的离子交换膜。带有不同电荷的局部依靠异电定向杂交排列。

5. 染色和可视化:通过电泳膜中的就地染料弱化各种血红蛋白,然后进行可视化和记录。

总结

在糖尿病诊断和管理中,糖化血红蛋白的测量是非常重要的检测手段。HPLC和IEF方法是测量HbA1c的主要技术。测量糖化血红蛋白的选择和应用能够为医生和患者提供更准确的糖尿病诊断和管理,减少糖尿病的并发症发生率以及提高相关疾病的预后。