茶叶中氨基酸含量的测定

茶叶中氨基酸的含量是影响茶叶质量、特点和风味的重要因素之一。因此，对茶叶中氨基酸含量的测定具有很高的必要性。

一、测定方法

目前，常用的测定茶叶中氨基酸含量的方法主要有两种：色氨酸比色法和后续氨基酸分析法。

1. 色氨酸比色法

色氨酸比色法是一种常规的氨基酸分析方法，其测定范围包括茶叶的多种氨基酸。该方法基于色氨酸在pH7下和5,5二硫苏糖酸（DTNB）作用产生的黄色化合物的吸光度变化。通过比较未知浓度的茶叶样品与已知浓度的Colorimetric Standard Solution之间的吸光度，就可以计算出茶叶中色氨酸的含量。

2. 后续氨基酸分析法

后续氨基酸分析法是一种高精度、高灵敏度的氨基酸测定方法，能同时测定多种氨基酸。该方法特点是可以逐一检测各氨基酸的含量，可以检测出其他测定方法无法测定的非常规氨基酸。

二、实验流程

以茶叶样品测定茶叶中色氨酸含量的实验流程如下：

1. 样品的制备：将茶叶样品研磨成粉末，将约0.5克茶叶样品取出，并在75mL锥形瓶中加入10mL 6M HCl。加入30mg苄氧羰基氯（BOC）并快速振荡混合均匀，并盖上带有一根贯穿中间的U形玻璃管的气密活塞，用艾炉加热涂上610℃，让样品在七氟丙烷气氛中酸解1h。

2. 吸附剂的制备：将10mg L-苯酰丙氨酸吸附在1.0g聚苯乙烯肝素上制备吸附剂。

3. 逐一氨基酸分析：将制备好的吸附剂与处理好的样品进行混合，在90℃下水浴加热3h，并用针尖将吸附剂从取样口吸出，用0.05M氢氧化钠溶液洗净吸附剂。吸附剂中氨基酸残留将以这种方式进行逐一测定。

4. 光度计测定：将不同浓度的茶多酚添加到样品中，使各组成的茶多酚的浓度总和为5μmol/L，将500μL混合物质量样品用HCl调整pH至2.2，加入5μL 0.5%DTNB，搅拌均匀，30℃下时时记录吸光度的变化，最后以468nm的波长计算出样品中各项氨基酸的含量。

三、注意事项

在实验中需要特别注意的有：

1. 样品的制备过程中需要严格控制温度和时间，以避免氨基酸失活等影响实验结果的因素的干扰。

2. 实验操作过程中需要随时记录各操作步骤、各参数变化、实验结果等数据，以便于后续的分析和处理。

3. 在分析结果判定前，需要对实验数据进行统计分析，计算氨基酸含量的平均值、标准差等统计指标，并进行数据比较和判定。